Η τριμεθοπρίμη είναι ένα αντιβιοτικό που αναστέλλει τη σύνθεση του φυλλικού οξέος στα μικροβιακά κύτταρα, παρεμποδίζοντας τη σύνθεση του τετραϋδροφυλλικού οξέος, αναστέλλοντας την αναγωγάση του διυδροφυλλικού οξέος. Με αυτό τον τρόπο, παραβλάπτεται η σύνθεση του ριβονουκλεϊκού οξέος των μικροοργανισμών.