Η νοβοβιοκίνη παρέχει μέγιστη δραστικότητα έναντι των Staphylococcus aureus στελεχών που παράγουν β-λακταμάση και αυτών που δεν παράγουν β-λακταμάση. Επίσης αναστέλλει την παραγωγή της ανθεκτικής στην πενικιλίνη L-μορφής, κατά την παρουσία πενικιλίνης.